1、?赭曲霉毒素A簡(jiǎn)介

? ? ? 赭曲霉毒素（Ochratoxins）是一類由苯丙氨酸與異香豆素組成的結(jié)構(gòu)類似的聚酮類化合物，它是由曲霉菌和青霉菌產(chǎn)生的真菌毒素，依其發(fā)現(xiàn)順序分別稱為赭曲霉毒素A（OTA）、赭曲霉毒素B（OTB）、赭曲霉毒素C（OTC）和赭曲霉毒素D（OTD）。其中毒性最大、分布最廣的是赭曲霉毒素A。易存在于玉米、大豆、大麥、花生等谷物中。動(dòng)物進(jìn)食被赭曲霉毒素A污染的飼料后導(dǎo)致體內(nèi)赭曲霉毒素A的蓄積，而且不易被代謝降解，因此動(dòng)物性食品尤其是豬的腎臟、肝臟、肌肉、血液以及乳和乳制品中常有赭曲霉毒素A檢出，在傳統(tǒng)發(fā)酵食品中如豆醬、食醋中也被檢出。
? ? 赭曲霉毒素A主要通過競(jìng)爭(zhēng)性取代苯丙氨酰-tRNA 合成酶催化反應(yīng)中的苯丙氨酸來抑制相關(guān)蛋白質(zhì)合成，同時(shí)也能通過脂質(zhì)過氧化和自由基形成誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。赭曲霉毒素A對(duì)人和動(dòng)物具有腎毒性、致畸性、致癌性以及潛在的神經(jīng)毒性等。

2、?赭曲霉毒素A的限量標(biāo)準(zhǔn)

? ? 2017年10月，世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)將赭曲霉毒素A歸類在2B類致癌物清單中。歐盟對(duì)未加工谷物最高限量為5 μg/kg，谷物加工產(chǎn)品最高限量為3 μg/kg，葡萄酒及果酒中最高限量為2 μg/L。韓國(guó)對(duì)豆醬及其相關(guān)食品中赭曲霉毒素A 的最高限量為20 μg/kg。
? ? 我國(guó)飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB 13078-2017中規(guī)定配合飼料和青貯玉米中赭曲霉毒素A 含量不得超過100μg/kg。
? ? 我國(guó)《GB2761-2017食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》對(duì)食品中赭曲霉毒素A的限量規(guī)定如下：

3、?酶聯(lián)免疫法檢測(cè)赭曲霉毒素A

? ? 定量檢測(cè)原理基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）。酶標(biāo)板微孔包被有赭曲霉毒素A特異性抗體，赭曲霉毒素A標(biāo)準(zhǔn)品或樣品以及赭曲霉毒素A-HRP酶結(jié)合物（檢測(cè)溶液）加入包被有抗體的微孔中。赭曲霉毒素A -HRP酶結(jié)合物與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的赭曲霉毒素A競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合赭曲霉毒素A抗體。未結(jié)合的赭曲霉毒素A-HRP酶結(jié)合物在洗滌步驟中洗去。加入底物溶液后，產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。加入終止液終止反應(yīng)，藍(lán)色物質(zhì)變成黃色。450nm下測(cè)定吸光值，吸收光的強(qiáng)度與樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中赭曲霉毒素A的濃度成反比。

4、Symmetric?側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l檢測(cè)赭曲霉毒素A

?定量側(cè)向?qū)游鰴z測(cè)基于免疫層析測(cè)定原理。微孔中有耦合在膠體金上的赭曲霉毒素A抗體。在微孔中加入待測(cè)液，反復(fù)吹打形成懸浮混合液后開始孵育。在孵育過程中，赭曲霉毒素A（若存在）與膠體金抗體結(jié)合，達(dá)到抑制檢測(cè)線顯色的效果。將試紙條插入混合液中，液體沿試紙條垂直向上層析并層析至檢測(cè)區(qū)（檢測(cè)區(qū)內(nèi)有控制線和檢測(cè)線）。測(cè)試有效時(shí)，上方的控制線會(huì)顯色。檢測(cè)線的顏色深淺與樣品中赭曲霉毒素A酮濃度成反比。通過使用 S-Flow 軟件及對(duì)稱定量技術(shù)可以準(zhǔn)確測(cè)定赭曲霉毒素A的濃度。

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